Cos'è il gel di poliacrilammide?

Il gel di poliacrilammide è una soluzione comunemente usata nell'elettroforesi, il processo di separazione di molecole o particelle di dimensioni diverse passandole attraverso un gel e applicando la corrente elettrica.Esistono diverse ricette per il gel di poliacrilammide, ma in genere contiene acrilamide, acqua, un tampone, persolfato di ammonio (AP) e tetrametiletilendiammina (Temed).Questo gel funziona come una matrice che separa i composti in base alla loro carica e dimensione;Più acrilamide nella soluzione di gel, migliore separazione di molecole più piccole.In genere questo gel viene utilizzato per la separazione delle proteine e del DNA.

Nell'elettroforesi, un campo elettrico provoca il passaggio di particelle cariche attraverso un gel, che funziona come un setaccio per causare la separazione delle diverse particelle di dimensioni.Il gel assorbirà qualsiasi calore prodotto dalla corrente elettrica.Il gel di poliacrilammide è comunemente usato in questa procedura, ma l'agarosio, un'altra sostanza chimica che crea anche un gel simile, può essere utilizzato. I gel possono essere realizzati con una concentrazione variabile, con la quantità di acrilamide che varia da circa il 6% al 15%.Quando si mescola il gel, l'acrilamide non è inpolimerizzata, il che significa che rimane come singole molecole.L'aggiunta di altri prodotti chimici che promuovono il legame, come Temed, fa il collegamento delle molecole formando lunghe catene mdash;La Poly parte della poliacrilammide.

Il vantaggio principale del gel di poliacrilammide è che il numero di legami di collegamento e durezza possono essere controllati in base alla quantità iniziale di acrilamide e temed aggiunta.Un fattore principale nella concentrazione di acrilamide è la dimensione della molecola analizzata.Più piccoli sono separati i composti, maggiore è l'acrilamide;Le particelle molto piccole sono separate usando la massima concentrazione, il 15 percento. Acrylamide funziona controllando la quantità di attrito nel gel;La durezza del gel determina la quantità di attrito.I composti grandi si muoveranno attraverso il gel più lentamente in quanto vi è naturalmente più attrito o resistenza a causa delle loro dimensioni.I composti più piccoli si muovono più velocemente, poiché vi è meno attrito.Per evitare che piccoli composti si muovano dal gel, viene aggiunta più acrilamide per creare più attrito.

Gel di poliacrilammide del DNA viene utilizzato per separare i fili del DNA di diversa lunghezza.Pezzi di DNA si separeranno di un solo nucleotide, i composti che compongono ogni filo.Per sapere quali pezzi si riferiscono alle dimensioni specifiche, uno standard che contiene frammenti di dimensioni note viene comunemente eseguito insieme ai campioni.I pezzi del DNA vengono quindi confrontati con lo standard e viene determinata la dimensione del filo.

Una procedura simile viene utilizzata per determinare la dimensione delle proteine, molto spesso quelle nel sangue.Il sangue contiene due tipi principali di proteina: globulina, una proteina di grandi dimensioni e albumina sierica, una proteina molto piccola e carica negativamente.La separazione con gel di poliacrilammide viene utilizzata per determinare la quantità di ciascun tipo.